본 발명에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치는, 내부에 공급유로가 형성된 메인공급부와, 상기 공급유로에 세포를 주입하는 세포주입부와, 상기 공급유로에 상기 세포의 배양을 위한 배지를 주입하는 배지주입부를 포함하는 공급관 어셈블리 및 상기 공급유로와 연통되도록 상하 방향으로 형성된 낙하유로와, 상기 낙하유로의 하부에 구비되어 상기 낙하유로를 통해 중력 방향으로 유동된 세포 및 배지가 표면장력에 의해 물방울 형태의 행잉드롭을 형성하도록 하는 드롭형성부를 포함하는 행잉드롭 배양유닛을 포함한다.