본 발명은 중간엽줄기세포(Mesenchymal stem cell, MSC)를 유효성분으로 함유하는 난청 예방용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명에 따라 와우 외식편(Cochlear explant)과 공동배양된 MSC에서 HSP70 단백질 및 상기 단백질을 내재한 엑소좀이 증가하고, 이에 따라 이독성 약물에 의해 유발되는 와우의 내유모세포 및 외유모세포 손상을 예방하는 효과가 나타나는바, 본 발명에 따라 와우 외식편과 공동배양된 MSC를 난청 예방용 조성물의 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.