본 발명은 중간엽줄기세포 유래 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 난청 예방용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 중간엽줄기세포 배양액에 포함된 엑소좀, 및 중간엽줄기세포 및 와우 외식편의 공동배양액에 포함된 엑소좀 내에 HSP70 단백질이 높게 내재되어 있어 이독성 약물에 의해 유발되는 와우의 내유모세포 및 외유모세포 손상을 예방하는 효과가 나타나므로, 본 발명의 중간엽줄기세포의 배양액 및 이로부터 분리된 엑소좀, 본 발명에 따라 획득한 중간엽줄기세포 및 와우 외식편의 공동배양액 및 이로부터 분리된 엑소좀을 난청 예방용 조성물의 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.